mansion88明升(中国)

酵母双杂交筛库的实验思路是以诱饵载体，筛选酵母双杂交文库，经过对阳性克隆的多重报告基因检测、DNA测序和BLAST比对分析，确定互作蛋白。

酵母双杂交文库筛选交付标准

酵母双杂交文库筛选（无自激活）
实验阶段	周期	交付	服务报价
诱饵质粒的合成及扩增	15-20	诱饵质粒	在线询价
自激活检测及毒性检测	5-7	自激活检测图片
初筛	5-7	初筛图片
复筛	2-4	复筛图片
阳性克隆测序	2-4	测序及分析结果+阳性克隆菌液
一对一验证（点对点）	5-7	验证图片+验证的AD质粒
点板验证	3-4	验证图片
项目结束	1	项目报告

酵母双杂交文库筛选（有自激活）
实验阶段	周期	交付	服务报价
诱饵质粒的合成及扩增	15-20	诱饵质粒	在线询价
自激活检测及毒性检测	5-7	自激活检测图片
自激活抑制	5-7	自激活抑制图片(45mM3-AT浓度不能抑制实验结束)
初筛	5-7	初筛图片
复筛	2-4	复筛图片
阳性克隆测序	2-4	测序及分析结果+阳性克隆菌液
一对一验证（点对点）	5-7	验证图片+验证的AD质粒
点板验证	3-4	验证图片
项目结束	1	项目报告

部分客户发表文章

1、OsSHI1 Regulates Plant Architecture Through Modulating the Transcriptional Activity of IPA1 in Rice.The Plant Cell.DOI： 10.1105/tpc.19.00023(IF=9.6)

2、ERECTA1 Acts Upstream of the OsMKKK10-OsMKK4-OsMPK6 Cascade to Control Spikelet Number by Regulating.The Plant Cell.DOI： 10.1105/tpc.17.00959(IF=9.6)

3、CsMYB60 directly and indirectly activates structural genes to promote the biosynthesis of flavonols and proanthocyanidins in cucumber.Hortic Res. doi: 10.1038/s41438-020-0327-z.(IF=5.4)

4、A Novel NAC Transcription Factor,PbeNAC1, of Pyrus betuifoliaConfers Cold and Drought Tolerancevia Interacting with PbeDREBs andActivating the Expression ofStress-Responsive Genes.Frontiers.DOI： 10.3389/fpls.2017.01049.(IF=4.6)

案例展示

1、实验内容：
①诱饵载体pGBKT7-Bait的构建与鉴定
②Bait自激活检测

③文库转化
④阳性克隆的HIS3、ADE2、AUR1-C和MEL1报告基因检测

⑤酵母阳性克隆DNA提取和测序比对
⑥回转验证

2、实验结论：

本项目以Bait基因cDNA克隆为诱饵，筛选cDNA酵母双杂交文库，在筛选到的13个初始阳性中，经过鉴定结果显示有12个能激活HIS3、ADE2、AUR1-C和MEL1报告基因。经过对这些阳性克隆质粒进行DNA测序和BLAST比对分析，结果表明它们分别属于6种不同蛋白的编码基因。 顺利获得对这6株阳性克隆的回转验证检测，结果显示所有阳性克隆都能顺利获得对HIS3、ADE2、AUR1-C和MEL1报告基因的回转验证。

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