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摘要

    本文介绍了在兔体内制备抗多肽血清的免疫接种流程，想要制备效价高的兔多抗血清，少不了兔免疫接种环节。免疫时可能不止采用一种肽链免疫动物，而且使用多蛋白的肽序列会增加成功的概率。这种方法需要有较强的处理兔的经验(温和对待，约束力，免疫接种，取血样)。

材料

实验流程

1.收集血样(如从耳动脉或耳静脉)，每只兔准备2~5ml免疫前的血清。至少准备2只兔，以防一只家兔死亡或者免疫接种失败。

2.将0.7~1.0mg的肽-载体的连接体溶于1ml的PBS,并加入1ml FCA彻底混溶。每只兔免疫接种1ml这种稳定的乳浊液，在皮下多个位点接种，每个位点0.1~0.2ml。

3.2~6周后，准备-份新的乳浊制剂追加剂量，使用相同的连接体但添加的是弗氏不完全佐剂。如上所述在皮下多个位点接种。若免疫原的量有限，则使用初次免疫接种量的1/4。

4.在加强免疫后3周取兔血样，在4周后再次取血获取抗肽的血清。检测免疫反应。

5.在免疫反应最强的时候在动物身体许可的范围内取尽可能多的血样。对有免疫反应的兔子在合适的时间取血，这取决于对抗血清质量的要求或已取得了足够多的抗血清。将血清储存在-70℃。

6.可选:顺利获得免疫亲和层析法，将抗血清中不需要的成分(如抗载体的抗体)去掉以纯化抗肽的抗体。

以上便是在兔体内制备抗多肽血清的免疫接种流程，值得一提的是，如果第四步以后，如果5-6周后免疫反应依然较低，在10-12周再次加强免疫一次。并在最后一次接种后3-4周后再次取血。不要第三次加强免疫

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